開發Indolicidin之載體系統輸送TNF-α之反義寡核苷酸以治療類風濕性關節炎

以反義寡核苷酸（ASO）抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的基因表現可有效減輕類風濕性關節炎(RA)的病程。但缺乏合適的輸送載體造成其運用上的障礙。Indolicidin（IL）是源自牛嗜中性顆粒細胞的抗菌胜肽。在我們先前計畫中，證實IL 可促進質體DNA 輸送。因此在本計畫中，我們打算開發IL 載體系統以輸送可抑制TNF-α 之ASO。IL 將會被(i) 直接接合至ASO，(ii)開發成二聚體或雙頭基兩親體等形式的載體來與ASO 複合形成奈米顆粒。透過與IL 的C 端或N 端接合，可控制IL 與細胞膜的作用區段。這些載體的輸送效果將有助於闡明接合的方式以及IL 的疏水和陽離子區域對ASO輸送效果的影響。在體外測試中，我們將ASO 以載體送入小鼠巨噬細胞Raw 264.7，並利用脂多醣刺激所引發的TNF-α表達量來評估其抑制基因的效果。透過RT-PCR 和ELISA 測定，可了解ASO 輸送所造成TNF-α的mRNA 降解及其表現量減少的動力學變化。此外也會進行ASO 給藥的最佳化及生物相容性評估。我們以全血樣品評估所開發的載體是否可運用至循環系統中。最後所開發的系統將運用於以膠原蛋白誘導關節炎之DBA/1j 小鼠，由病理結果分析TNF-α阻斷效果及其對關節炎的舒緩功效。在此研究我們將全面性設計IL 載體，雖然目的是開發針對RA 的治療，但也預期此輸送系統能運用於治療其他需要抑制基因表現的疾病。