不同分子結構去氧核糖核酸與miRNA結合機制探討以提升miRNA檢測技術在醫學診斷與藥物發展之應用(3/3)

MicroRNA(miRNA)是短片段的RNA，做為後轉譯(Post-translational)之調控分子。miRNA扮演病理發展(pathogenesis)上重要角色。miRNA是有相當潛力成為重要的生物指標分子(Biomarker)，可當成一種疾病檢測(diagnostics)之目標分子(targeting molecule)甚至醫療上(therapeutic)之新藥發展。從檢測的角度上，現今量測miRNA的技術中還是建立在傳統分子生物學的技術裡，包含複製、北方點墨法、microarray or RT-PCR等，但這些技術在進入商業開發中都面臨低產量、敏感度不夠，而且需要大量勞工來重複許多簡單的操作步驟，但是若要真正實行檢測miRNA商業化,就必須提高量測的敏感性，因為從人體血液中萃取到的miRNA濃度都是非常低的，額外的挑戰還包含檢測的方法必須具有高選擇性、重復性等。所以發展一具有高專一性之辨識(recognition molecule)分子與傳感器(transducer)，並了解其分子間作用機制以達最佳化作用條件等是發展miRNA檢測(profiling)是重要的，也是本計劃之計劃目標。本計劃所選定之高專一性辨識分子包括Locked Nucleic Acid (LNA), Peptide Nucleic Acid (PNA),及一般DNA等probe或primer來探討與miRNA之結合機制熱力學與動力學與結構等並配合其誘導之DNA合成(extension)之專一性等。研究內容包括ITC (Isothermal Titration Calorimetry) 的熱力學及SPR (Surface Plasmon Resonance)的動力學等基礎資訊，加上Circular Dichroism 和螢光光譜結構資料，配合PCR與qPCR (Polymerase Chain Reaction)來探討結合專一性與其生物活性，以期能提供miRNA檢測與profiling能實現於一般檢驗實驗室實現之可能。建立不同辨識分子與miRNA在轉譯醫學上當成Biomarker上之應用性。