自腫瘤組織使用膜過濾法分離和建立癌細胞品系：建立分離癌細胞品系的模式試驗

癌起始細胞(CIC)或癌幹細胞(CSC)通常僅佔總腫瘤細胞群體的一小部份(可能僅有幾個百分比的程度)。目前，缺法可靠的癌細胞表面標記供作篩選指標，因此，以細胞表面標記作為篩選指標的傳統分離方法分離如磁激活細胞分選 (MACS) 和熒光激活細胞分選 (FACS) 方法，在癌幹細胞的篩選上無用武之地。本實驗室為了有效分離 CIC或CSC，設計了一種膜過濾方法來富集結腸癌細胞系（HT29、CoLo205和LoVo細胞）和卵巢癌細胞系（ES-2、OVCAR3 和SKOV）的CIC，該方法係利用尼龍過濾膜(孔徑11和 20微米)和聚乳酸羥基乙酸共聚物絲網（PLGA/絲網）多孔膜（孔徑為20-30微米）。含有成纖維細胞的癌細胞溶液將通過膜過濾以獲得滲透液。隨後，細胞培養基將通過膜過濾以收集回收液，然後將膜反向以細胞培養基沖洗收集貼附在膜上的未過膜細胞，最後將膜置入培養皿中培養從膜中遷移出的細胞。即滲透溶液或回收溶液中的細胞或遷移的細胞將具有 (1)表達更高量的細胞報導蛋白，(2) CSC表面標誌物（CD44 和CD133）和（2）更高的細胞團(集落)形成能力並與在常規組織培養板上培養的癌細胞（對照組）進行比較。本研究的目的是建立一種有效的膜過濾富集癌起始細胞(癌幹細胞) 的方法。